home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ The Pier Shareware 6 / The_Pier_Shareware_Number_6_(The_Pier_Exchange)_(1995).iso / 026 / med9410a.zip / M94A0128.TXT < prev    next >
Text File  |  1994-10-01  |  3KB  |  44 lines
  1.        Document 0128
  2.  DOCN  M94A0128
  3.  TI    Folding of the multidomain human immunodeficiency virus type-I
  4.        integrase.
  5.  DT    9412
  6.  AU    Grandgenett DP; Goodarzi G; Institute for Molecular Virology, St. Louis
  7.        University, Missouri; 63110.
  8.  SO    Protein Sci. 1994 Jun;3(6):888-97. Unique Identifier : AIDSLINE
  9.        MED/94348418
  10.  AB    Protein folding conditions were established for human immunodeficiency
  11.        virus integrase (IN) obtained from purified bacterial inclusion bodies.
  12.        IN was denatured by 6 M guanidine.HCl-5 mM dithiothreitol, purified by
  13.        gel filtration, and precipitated by ammonium sulfate. The reversible
  14.        solvation of precipitated IN by 6 M guanidine.HCl allowed for wide
  15.        variation of protein concentration in the folding reaction. A 6-fold
  16.        dilution of denatured IN by 1 M NaCl buffer followed by dialysis
  17.        produced enzymatically active IN capable of 3' OH end processing, strand
  18.        transfer, and disintegration using various human immunodeficiency
  19.        virus-1 (HIV-1) long terminal repeat DNA substrates. The specific
  20.        activities of folded IN preparations for these enzymatic reactions were
  21.        comparable to those of soluble IN purified directly from bacteria. The
  22.        subunit composition and enzymatic activities of IN were affected by the
  23.        folding conditions. Standard folding conditions were defined in which
  24.        monomers and protein aggregates sedimenting as dimers and tetramers wree
  25.        produced. These protein aggregates were enzymatically active, whereas
  26.        monomers had reduced strand transfer activity. Temperature modifications
  27.        of the folding conditions permitted formation of mainly monomers. Upon
  28.        assaying, these monomers were efficient for strand transfer and
  29.        disintegration, but the oligomeric state of IN under the conditions of
  30.        the assay is determinate. Our results suggest that monomers of the
  31.        multidomain HIV-1 IN are folded correctly for various catalytic
  32.        activities, but the conditions for specific oligomerization in the
  33.        absence of catalytic activity are undefined.
  34.  DE    Ammonium Sulfate  Blotting, Western  Chromatography, Gel  Dithiothreitol
  35.        DNA Nucleotidyltransferases/*CHEMISTRY/METABOLISM  DNA, Viral/METABOLISM
  36.        Enzyme Stability  Freezing  Guanidines  Heat  HIV Long Terminal Repeat
  37.        HIV-1/*ENZYMOLOGY  Precipitation  Protein Denaturation  *Protein Folding
  38.        Recombinant Proteins/CHEMISTRY/METABOLISM  Support, U.S. Gov't, P.H.S.
  39.        JOURNAL ARTICLE
  40.  
  41.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  42.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  43.  
  44.