home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ The Pier Shareware 6 / The_Pier_Shareware_Number_6_(The_Pier_Exchange)_(1995).iso / 026 / med9408e.zip / M9480872.TXT < prev    next >
Text File  |  1994-09-05  |  3KB  |  46 lines
  1.        Document 0872
  2.  DOCN  M9480872
  3.  TI    Polymerase chain reaction (PCR) detection of Mycobacterium
  4.        avium-intracellulare (MAI) DNA from peripheral blood mononuclear cells
  5.        (PBMCs) of HIV-infected patients.
  6.  DT    9410
  7.  AU    Kostman J; Mair M; Byrne B; Gekowski K; Baxter J; Cooper Hospital/UMC,
  8.        Robert Wood Johnson Medical School, Camden,; N.J.
  9.  SO    Abstr Gen Meet Am Soc Microbiol. 1994;94:188 (abstract no. U-91). Unique
  10.        Identifier : AIDSLINE ASM94/94313073
  11.  AB    Rapid detection and identification of MAI from the blood of HIV-infected
  12.        patients is necessary for the prompt initiation of treatment. We
  13.        performed DNA amplification with the polymerase chain reaction of
  14.        mycobacterial DNA from frozen PBMCs collected from HIV-infected
  15.        patients. Heparinized blood was collected from HIV-infected patients
  16.        (CD4 counts < 90/mm3) and PMBCs were prepared using a standard
  17.        Ficoll-Paque separation and stored at 70 degrees C until further
  18.        analysis. DNA was isolated from cells after lysis with lysozyme,
  19.        digestion with proteinase K, phenol-chloroform extraction, and ethanol
  20.        precipitation. Two sets of oligonucleotide primers based on 16S
  21.        ribosomal RNA sequences were used to amplify any mycobacterial
  22.        sequences. One primer pair amplified DNA from any mycobacterial species;
  23.        internal primers were then used to amplify and distinguish DNA from
  24.        either M. avium (194 base pairs) or M. intracellulare (519 base pairs).
  25.        All samples were analyzed by PCR in a blinded fashion. We detected
  26.        mycobacterial DNA from 9 of 14 samples of stored PBMCs, representing 7
  27.        patients. Two patients who subsequently had positive blood cultures for
  28.        MAI had mycobacterial DNA detected from PBMCs at 8 and 12 months prior
  29.        to the time of the positive cultures. These patients had symptoms
  30.        compatible with disseminated MAI at the time the mycobacterial DNA was
  31.        detected. No patients with positive blood cultures were negative by PCR.
  32.        All positive samples were determined to be M. avium. The prompt
  33.        detection of mycobacterial DNA from PBMCs of HIV-infected patients with
  34.        low CD4 counts offers a sensitive, cost-effective alternative to routine
  35.        culture techniques. Detection of disseminated infection with MAI at an
  36.        earlier stage may lead to improved therapeutic responses.
  37.  DE    AIDS-Related Opportunistic Infections/BLOOD/*MICROBIOLOGY  Cells,
  38.        Cultured  DNA Primers  DNA, Bacterial/*BLOOD/ISOLATION & PURIF  Human
  39.        Monocytes/*MICROBIOLOGY  Mycobacterium avium Complex/GENETICS/*ISOLATION
  40.        & PURIF  Polymerase Chain Reaction/*METHODS  Single-Blind Method
  41.        Tuberculosis/BLOOD/COMPLICATIONS/*DIAGNOSIS  MEETING ABSTRACT
  42.  
  43.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  44.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  45.  
  46.