home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ NetNews Usenet Archive 1992 #27 / NN_1992_27.iso / spool / bionet / molbio / methdsr / 2612 < prev    next >
Encoding:
Internet Message Format  |  1992-11-23  |  1.9 KB
  1. Path: sparky!uunet!europa.asd.contel.com!darwin.sura.net!fconvx.ncifcrf.gov!ntet.nctr.fda.gov!wmelchior
  2. From: wmelchior@ntet.nctr.fda.gov
  3. Newsgroups: bionet.molbio.methds-reagnts
  4. Subject: Re: dye removal from ABI terminator reactions.
  5. Message-ID: <1992Nov23.105637.59@ntet.nctr.fda.gov>
  6. Date: 23 Nov 92 10:56:37 -0600
  7. References: <9211192226.AA14131@deimos.med.pitt.edu>
  8. Distribution: bionet
  9. Organization: NATIONAL CENTER FOR TOXICOLOGICAL RESEARCH
  10. Lines: 24
  11.  
  12. > We now routinely purify the excess dye from reactions using home (lab)-made
  13. > quick spin columns.  They may not overcome the tedium but they sure are 
  14. > cheap.  We make a hole in the bottom of 0.5 ml eppendorf using a 26 g needle
  15. > and add about 25 ul volume of zirconium glass beads.  Then I pour sephadex
  16.                                 ^^^^^^^^^
  17. > G-50 in 0.3M NaAc (5g in 60 ml) to the top of the tube.  Stick the small
  18. > eppendorf inside a 2 ml tube and spin at about 500 rpm for couple of minutes.
  19. > Now the tube is transferred to a new 1.5 ml tube and the sample is added on
  20. > top.  Now I spin at about 1500 rpm for couple of minutes.  
  21. > The eluate is precipitated by atleast 3 volumes of isopropanol washed with
  22. > 70% etoh and resuspended for loading.
  23.  
  24. Raj-
  25. Thanks for the method.  One question: why _zirconium_ glass beads?  
  26. Wouldn't regular glass work as well?  And what size beads do you use?
  27. ________________________________________________________________________________
  28. The opinions stated are mine, not those of NCTR or its sponsoring organizations.
  29.  
  30. Bill Melchior                                ||     OMNISCIENCE
  31. National Center for Toxicological Research   ||    Knowing what
  32. Jefferson, AR  72079                         ||    thou knowest not
  33. (501) 543-7206                               ||    is in a sense
  34.                                              ||    omniscience.
  35. WMELCHIOR@NTET.NCTR.FDA.GOV                  ||       from Grooks, Piet Hein
  36.