V∞tÜinu obrßzk∙ tohoto oddφlu nasnφmal kolektiv autor∙ z ┌stavu technologie mlΘka a tuk∙ pod vedenφm Dr.ing. Jany ChumchalovΘ.
Psychrotrofnφ grampozitivnφ pohyblivß tyΦinka tvo°φcφ spory
V²skyt: p∙da, hn∙j, krmivo
PotravinovΘ kontaminace a ka₧enφ: ko°enφ, r²₧e, pudink, suÜenΘ mlΘΦnΘ v²robky, koagulace mlΘka a smetan proteasami za vzniku ho°k²ch peptid∙ tzv. sladkΘ srß₧enφ mlΘka
Tvorba: toxiny: emetick² (termostabilnφ û nenφ inaktivovßn zßh°evem 128oC 90 min)
diarhogennφ (extracelulßrnφ termolabilnφ û inaktivace 56oC 5 min)
virulenΦnφ faktory zvyÜujφcφ patogenicitu: fosfolipasa, hemolysin, aj.
Onemocn∞nφ: gastroenteritida
Minimßlnφ nßrust mikroorganismu v potravin∞ zp∙sobujφcφ vznik onemocn∞nφ:
105 a₧ 9.5 x 108 bun∞k/g pro diarhogennφ toxin
2 x 107 bun∞k/g pro emetick² toxin
Znaky: hemol²za
Stanovenφ: p∙da MYP (Mannitol-Yolk (Äloutek)-Polymyxin) (ISO 7032)
Kultivace: GTK, Äivn² agar, 37 ░C, 16 - 18 h, aerobn∞
TaxonomickΘ za°azenφ:
NepravidelnΘ, nesporulujφcφ, grampozitivnφ tyΦinky, variabilinφ morfologie, zßvisφ na druhu a mno₧stvφ dusφkat²ch zdroj∙ v mΘdiu a anaerobnφ atmosfΘ°e
Kultivace:
Optimßlnφ teplota 37 40 °C, doba kultivace 16 a₧ 20 h, doporuΦenß kultivaΦnφ mΘdia: obnovenΘ mlΘko s kvasniΦn²m autolyzßtem, TPY, MRS s dicloxacilinem a L-cysteinem (slo₧enφ mΘdiφ viz KultivaΦnφ mΘdia)
TypickΘ vlastnosti:
v∞tÜinou G+granulovanΘ tyΦinky, variabilnφ morfologie (tvar Y), shluky, anaerobnφ, chu¥ mlΘΦn∞ octovß, °idÜφ konzistence, souΦßst sm∞sn²ch jogurtov²ch kultur, probiotickΘ preparßty
A-Obr. 7 Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v MRS mΘdiu.
Krßtkß, pohyblivß, gramnegativnφ asporogennφ tyΦinka, fermentujφcφ laktosu s produkcφ kyselin a plynu p°i 37oC b∞hem 48 h
V²skyt: v lidsk²ch i zvφ°ecφch fekßliφch. Je d∙le₧itß jako indikßtor fekßlnφho zneΦiÜt∞nφ.
N∞kterΘ kmeny jsou patogennφ:
╖ Enteropatogennφ E.coli (EPEC) zp∙sobujφcφ mφrnΘ pr∙jmy u d∞tφ
╖ Enterotoxigennφ E.coli (ETEC) zp∙sobujφcφ pr∙jmy vΦetn∞ tzv. äcestovnφch". Produkuje tepeln∞ labilnφ (inaktivovßn 60oC/30min) a/nebo tepeln∞ stabilnφ (resistentnφ p°i 100oC/15 min) toxiny.
╖ Enteroinvazivnφ E.coli (EIEC) produkujφcφ cytotoxin
╖ Enterohemorhagickß E.coli (EHEC) zp∙sobujφcφ t∞₧kΘ krvavΘ pr∙jmy, kterΘ u d∞tφ a starÜφch osob trpφcφch anaemiφ mohou konΦit i smrtφ. (Olsvik et al., 1991). U EHEC nalezena produkce cytotoxin∙ (SLT shiga-like toxins) a verotoxin∙ (VT verotoxins). Nejobßvan∞jÜφm verotoxinogennφm serotypem E. coli (VTEC) je Escherichia coli O157:H7 (Vernozy-Rozand, 1997).
E. coli O157:H7. Kontaminace: hov∞zφ produkty a nedostateΦn∞ upravenΘ hov∞zφ maso, jableΦn² moÜt, pitnß voda, kr∙tφ rolka, syrovΘ mlΘko, ovoce a zelenina (Firstenberg, 1997), jogurt (Morgan et al., 1993) a konzumaci pasterovanΘho mlΘka (Upton and Coia, 1994).
Kultivace: V╚ÄL, Chromocult 30-37░C, 18-24 h, aerobn∞
TaxonomickΘ za°azenφ:
PravidelnΘ, nesporulujφcφ, grampozitivnφ tyΦinky
Kultivace:
Optimßlnφ teplota 37 °C, doba kultivace 16 h, doporuΦenß kultivaΦnφ mΘdia: obnovenΘ mlΘko, MRS, syrovßtkov² agar (slo₧enφ mΘdiφ viz KultivaΦnφ mΘdia)
TypickΘ vlastnosti:
G+ tyΦinky jednotliv∞, ve dvojicφch nebo trojicφch, fakultativn∞ anaerobnφ, chu¥ mlΘΦnß, Φistß, ost°e kyselß, konzistence hustß, chu¥ Φist∞ mlΘΦnß, v²roba fermentovan²ch mlΘΦn²ch v²robk∙, probiotickΘ preparßty, zv²Üenß antibiotickß aktivita
A-Obr. 5 Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v MRS mΘdiu.
Mikroskopick² obraz: G+ tyΦinky tenÜφ, kratÜφ i st°edn∞ dlouhΘ, a₧ vlßknit∞ prota₧enΘ, n∞kdy se °et∞zφcφ; Üpatn∞ se probarvujφ
Znaky: TK 40-60
SenzorickΘ vlastnosti: chu¥ Φist∞ kyselß, konzistence hustß
Pou₧itφ: dopl≥kovß kultura pro v²robu s²r∙
Kultivace: Odst°ed∞nΘ mlΘko, MRS, 30 ░C, 48 h, srß₧enφ nastßvß za 28-30 h r∙stu, 3, 30 ░C, 16-18 h aerobn∞
Mikroskopick² obraz: G+ tyΦinky
Znaky: antifungßlnφ ·Φinky
Kultivace: Odst°ed∞nΘ mlΘko s 0.5 % kvasniΦnΘho autolyzßtu, MRS, 30 ░C, 16-18 h aerobn∞
Mikroskopick² obraz: G+ tyΦinky kratÜφ i st°edn∞ dlouhΘ siln∞jÜφ tyΦinky, bez granulace
SenzorickΘ vlastnosti: chu¥ v²razn∞ kyselß, aromatickß jogurtovß, konzistence hustß, film potrhan²
Pou₧itφ: pro v²robu jogurt∙ a s²r∙
Kultivace: MRS, 37 - 45░C, 16 - 20 h v bujonu, 3-5 dnφ v agaru, aerobn∞ i anaerobn∞
TaxonomickΘ za°azenφ:
PravidelnΘ, nesporulujφcφ, grampozitivnφ tyΦinky
Kultivace:
Optimßlnφ teplota 3740 °C, doba kultivace 16 a₧ 24 h, doporuΦenß kultivaΦnφ mΘdia: obnovenΘ mlΘko, MRS (slo₧enφ mΘdiφ viz KultivaΦnφ mΘdia)
TypickΘ vlastnosti:
G+ dlouhΘ tyΦinky, fakultativn∞ anaerobnφ, citlivost v∙Φi acidocinu a nisinu v odst°ed∞nΘm mlΘce, chu¥ mlΘΦnß, Φistß, v²razn∞ kyselß, konzistence hustß, s²ra°skß kultura, v²roba s²r∙ s nφzko- i vysokodoh°φvanou sy°eninou
Obr. 1a Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v MRS mΘdiu.
Obr. 1b Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v obnovenΘm mlΘce.
TaxonomickΘ za°azenφ:
PravidelnΘ, nesporulujφcφ, grampozitivnφ tyΦinky
Kultivace:
Optimßlnφ teplota 3042 °C, doba kultivace 16 a₧ 18 h, doporuΦenß kultivaΦnφ mΘdia: obnovenΘ mlΘko, MRS (slo₧enφ mΘdiφ viz KultivaΦnφ mΘdia)
TypickΘ vlastnosti:
G+ tyΦinky jednotliv∞ nebo ve dvojicφch, tvorba vlßken, fakultativn∞ anaerobnφ, chu¥ Φist∞ mlΘΦnß, souΦßst sm∞sn²ch kefφrov²ch kultur
Obr. 3 Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v MRS mΘdiu.
TaxonomickΘ za°azenφ:
PravidelnΘ, nesporulujφcφ, grampozitivnφ tyΦinky
Kultivace:
Optimßlnφ teplota 30 °C, doba kultivace 18 h, doporuΦenß kultivaΦnφ mΘdia: obnovenΘ mlΘko, MRS (slo₧enφ mΘdiφ viz KultivaΦnφ mΘdia)
TypickΘ vlastnosti:
G+ krßtkΘ tyΦinky, jednotliv∞ i ve shlucφch, aerobnφ, chu¥ Φist∞ mlΘΦnß, ost°e kyselß, dopl≥kovß s²ra°skß kultura, v²roba s²r∙ z ovΦφho mlΘka, souΦßst silß₧nφch kultur
Obr. 2 Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v MRS mΘdiu.
Mikroskopick² obraz: G+tyΦinky
Znaky: antifungßlnφ ·Φinky
Kultivace: Odst°ed∞nΘ mlΘko s 0.5 % kvasniΦnΘho autolyzßtu, MRS, 37 ░C, 16-18 h, aerobn∞
TaxonomickΘ za°azenφ:
PravidelnΘ, nesporulujφcφ, grampozitivnφ tyΦinky
Kultivace:
Optimßlnφ teplota 37 °C, doba kultivace 18 h, doporuΦenß kultivaΦnφ mΘdia: obnovenΘ mlΘko, MRS (slo₧enφ mΘdiφ viz KultivaΦnφ mΘdia)
TypickΘ vlastnosti:
G+ krßtkΘ tyΦinky jednotliv∞, ve dvojicφch nebo trojicφch, anaerobnφ, chu¥ Φist∞ mlΘΦnß, v²roba fermentovan²ch mlΘΦn²ch v²robk∙, probiotickΘ preparßty
Obr. 4 Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v MRS mΘdiu.
Mikroskopick² obraz: G+ tyΦinky
Znaky: citliv² v∙Φi acidocinu CH5, pomal² r∙st v agaru, slab² nßrust v bujonu
Kultivace: Odst°ed∞nΘ mlΘko s 0.5 % kvasniΦnΘho autolyzßtu, MRS, 37 ░C, 16-18 h, aerobn∞
Mikroskopick² obraz: G+tyΦinky
Znaky: antifungßlnφ ·Φinky
Kultivace: Odst°ed∞nΘ mlΘko s 0.5 % kvasniΦnΘho autolyzßtu, MRS, 37 ░C, 16-18 h, aerobn∞
TaxonomickΘ za°azenφ:
Grampozitivnφ koky
Kultivace:
Optimßlnφ teplota 30 °C, doba kultivace 18 h, doporuΦenß kultivaΦnφ mΘdia: obnovenΘ mlΘko, M17 (slo₧enφ mΘdiφ viz KultivaΦnφ mΘdia)
TypickΘ vlastnosti:
G+ koky, diplokoky, kratÜφ °etφzky, fakultativn∞ anaerobnφ, chu¥ Φist∞ mlΘΦnß, kyselß, konzistence kompaktnφ, porcelßnovitΘho vzhledu, souΦßst kyselinotvornΘ slo₧ky zßkladnφch smetanov²ch kultur, produkce nisinu
Obr. 8 Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v MRS mΘdiu.
Psychrotrofnφ gramnegativnφ asporogennφ tyΦinka
V²skyt: p∙da, krmivo, zvφ°ecφ fekßlie, hmz, slepiΦφ sko°ßpky
Vlastnosti: v²raznß lipolytickß aktivita
PotravinovΘ kontaminace a ka₧enφ: smetana a mßslo û ₧luknutφ
Kultivace: na Üikm²ch agarech GTK, Äivn² agar, 23░C, 48-72 h, aerobn∞
Mikroskopick² obraz: G+ koky
SenzorickΘ vlastnosti: chu¥ v²razn∞ kyselß, aromatickß jogurtovß, konzistence hustß, film potrhan²
Pou₧itφ: pro v²robu jogurt∙ a s²r∙
Kultivace: MRS, 37 - 45░C, 16 - 20 h v bujonu, 3-5 dnφ v agaru, aerobn∞
TaxonomickΘ za°azenφ:
Grampozitivnφ koky
Kultivace:
Optimßlnφ teplota 37 °C, doba kultivace 16 h, doporuΦenß kultivaΦnφ mΘdia: obnovenΘ mlΘko, syrovßtkov² agar (slo₧enφ mΘdiφ viz KultivaΦnφ mΘdia)
TypickΘ vlastnosti:
G+koky, diplokoky, kratÜφ i delÜφ °etφzky, fakultativn∞ anaerobnφ, chu¥ a v∙n∞ mlΘΦn∞ kyselß, konzistence smetanovß, mφrn∞ tßhlovitß, souΦßst sm∞sn²ch jogurtov²ch a termofilnφch kultur, vhodn² pro sklßdßnφ kultur s mφrn∞ vazkou konzistencφ
Obr. 6a Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v MRS mΘdiu.
Obr. 6b Nßr∙st bakterie po 18h kultivace v obnovenΘm mlΘce.
Obr. 6c Nßr∙st bakterie po 48h kultivace na MRS ztu₧enΘm mΘdiu.